马血清的冻融,细节很重要

　　马血清冻融说明：

　　1.将血清从冷冻箱取出后，先置于2-8℃冰箱12-24小时左右使之溶解，然后在室温下使之全溶。但必须注意的是，溶解过程中必须规则地摇晃均匀。

　　2.切勿将刚刚从-20℃冰箱里拿出来的血清直接放在水浴中，无论室温的水或者37℃的水，因为在水浴中血清迅速熔化，很大的温差（-20℃到37℃，温差为57℃）极其容易造成血清产生沉淀。

　　3.直接放65℃水浴中更是极其不对的做法，是对血清的亵玩，对科学规则的粗暴践踏！

　　4.血清应该在-10 ℃以下保存。若一次无法用完一瓶，应该无菌分装，再冷冻保存。

　　5.若您欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起培养。

　　6.不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞您的过滤膜。

　　7.马血清在贮存解冻过程中会产生沉淀，这是由于血清中含有大量脂蛋白、纤维蛋白及多肽类物质，在-15℃冷冻保存解冻后就会自然形成沉淀，随着保存时间的延长，沉淀量会增加。因此在融化血清时一般应先在4℃放置使之解冻，然后放在室温使血清*融化，以避免沉淀的增加。添加血清时应避免把沉淀加入培养液，否则由于沉淀的存在会使得所培养的细胞产生大量黑点，或者细胞表面将会覆盖一层油状物质，影响细胞的正常生长。为减少血清的损失，可以把有沉淀的血清收集起来进行离心处理，将上清液加入培养液使用（一般不建议采用过滤的方法除去沉淀，因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤）。